重要提示
采用EnvirusTM-AdV增強后，感染時的細胞融合度對感染效果有影響，建議細胞融合度在30-50%左右時進行感染實驗。確定了細胞量以后，建議采用倍比稀釋的方法，用不同量的腺病毒（MOI值：1－1000pfu/cell）進行實驗以確定的腺病毒用量。EnvirusTM-AdV和病毒的稀釋液采用和細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基一致的無血清液體，如無血清DMEM或1640。
實驗過程（以24孔板感染為例）
提前一天將細胞種植在24孔板中，以感染時細胞融合度在30-50%左右為宜(懸浮細胞根據(jù)需要調(diào)整，不要采用過高的細胞密度)。將4ul的EnvirusTM-AdV用25μl無血清稀釋液稀釋，充分混勻，制成EnvirusTM-AdV稀釋液。4℃靜置5分鐘。將適量病毒原液或稀釋液與EnvirusTM-AdV稀釋液輕柔混勻，4℃靜置15分鐘。
注：如采用病毒原液直接混合出現(xiàn)沉淀，建議用與⑴等量同樣的無血清稀釋液稀釋病毒。
將上述混合液加入到含*培養(yǎng)基的細胞上，37℃培養(yǎng)8小時后觀察細胞狀態(tài)，如沒有明顯變化，不要更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。由于腺病毒感染較快，可分別在12，24，48小時觀察表達情況。
注：適當(dāng)減少感染時的細胞培養(yǎng)基量可以增加感染效率，但也可能增加細胞毒性。如出現(xiàn)細胞毒性可增加培養(yǎng)基量或更換培養(yǎng)基。
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